Les souches de Staphylococcus aureus obtenues à partir de réseaux d’utilisation de drogues sont étroitement liées

Les utilisateurs de drogues ont une plus forte incidence de colonisation par Staphylococcus aureus que la population générale et, par conséquent, ils sont exposés à un risque accru d’infection par leur souche colonisatrice. Le but de cette étude était d’examiner le rôle des réseaux de Dans la transmission de S aureus, la similitude des isolats de S aureus dans ces réseaux et le rôle possible de l’inhalation dans la transmission des souches de S. aureus sont partagés chez les utilisateurs de drogues par inhalation colonisées dans les réseaux à risque d’utilisation de drogues. les schémas de consommation de drogues et l’emplacement géographique où se produit le partage des médicaments sont des facteurs importants du transfert des staphylocoques et, par conséquent, de la forte prévalence de la colonisation staphylococcique et peut-être de la maladie dans cette population

Staphylococcus aureus est la cause la plus fréquente d’infection bactérienne chez les utilisateurs de drogues Ces infections varient en gravité des infections mineures de la peau et des tissus mous aux infections systémiques potentiellement mortelles qui comprennent l’endocardite et le choc septique La fréquence, le spectre et la gravité ces infections ont été prolongées par l’épidémie de VIH, l’utilisation accrue de médicaments par inhalation au cours des dernières années et la propagation du SARM S aureus résistant à la méthicilline dans les communautés toxicomanes [,,] De nombreuses études ont répertorié la diversité des infections staphylococciques. les usagers de drogues; Cependant, les utilisateurs de drogues, de même que les diabétiques, les hémodialysés et les personnes infectées par le VIH, ont une incidence accrue de la colonisation nasale par les staphylocoques. En conséquence, ils présentent un risque accru de développer des infections avec leurs souches colonisatrices Tuazon et Sheagren et Tuazon et al ont montré que les souches staphylococciques responsables du portage nasal chez les toxicomanes, plutôt que les souches récupérées d’héroïne ou d’injection Dans une étude ultérieure, les utilisateurs de drogues inhalées infectées par le VIH avaient une incidence de colonisation par S aureus plus élevée que les autres usagers de drogues, ce qui un véhicule pour la transmission bactérienne Bien que ces études antérieures ont identifié le rôle de la colonisation nasale dans la suite Il existe peu d’informations sur la question de savoir si la transmission des souches parmi les toxicomanes qui partagent la drogue ou l’attirail contribue à la prévalence élevée de la maladie staphylococcique dans cette population.Le but de la présente enquête était d’examiner la prévalence et les modes de transport du S aureus chez les toxicomanes. une zone géographiquement définie, pour examiner la capacité des techniques d’épidémiologie moléculaire à aider à définir les réseaux de risque d’utilisation de drogues, et pour examiner le potentiel de l’attirail de médicaments par inhalation pour transmettre S aureus

Patients et méthodes

Collecte de données

Au cours d’une période de juin à janvier, les utilisateurs de drogues par inhalation participant à un programme communautaire ont été invités à participer à l’étude. Les sujets étaient inclus dans l’étude s’ils étaient âgés de ⩾ ans et admis. ⩾ médicament Après avoir reçu un consentement éclairé, l’enquêteur a demandé aux participants à l’étude: l’achèvement d’un bref questionnaire concernant les informations démographiques, le comportement d’utilisation de drogues, les antécédents médicaux, l’utilisation d’antibiotiques et les informations de base sur les réseaux sociaux; le don d’un attirail d’inhalation usagé, p. ex. une paille ou un cahier d’allumettes; et la permission d’obtenir un échantillon de culture des narines antérieures du sujet avec un coton-tige stérile Culturette; Becton Dickinson pour dépister le S aureusLes données ont été obtenues dans des endroits où les sujets utilisaient activement des drogues. Trois sites étaient dans un rayon de -bloc et comprenaient une maison de crack, et les sites étaient à des blocs de la maison de crack. la stratégie de recrutement, les participants ont été invités à inviter d’autres personnes avec qui ils ont utilisé des médicaments à participer à l’étude Cette étude a été examinée et approuvée par le Conseil d’examen institutionnel de l’Université de Columbia à New York

Analyse de laboratoire

Des échantillons nasaux ont été étalés directement sur de l’agar-sel de mannitol pour h à ° C, suivi d’un isolement sur des plaques de gélose au sang pour h à ° C. L’identification a été confirmée par l’utilisation de StaphAurex Murex Biotech. Passer au vortex dans du bouillon Todd Hewitt et le mélanger directement sur une gélose au sel de mannitol. Pour maximiser la récupération de S aureus, une partie aliquote de ce bouillon mL a été incubée pendant une nuit en mL de bouillon Todd Hewitt à ° C puis traitée comme décrit ci-dessus. congelé à – ° C en% glycérol pour un typage ultérieurL’analyse de sensibilité aux antibiotiques a été réalisée à ° C sur gélose Mueller-Hinton Becton Dickinson au moyen de la technique de diffusion sur disque, comme indiqué par le Comité National de Normes Cliniques de Laboratoire. vancomycine, triméthoprime-sulfaméthoxazole, rifampicine, pénicilline, oxacilline, lévofloxacine, gentamicine, érythromycine, clinda mycine, céphalothine, ampicilline et amikacine Becton DickinsonPFGE a été réalisée sur des isolats de S aureus comme décrit ailleurs Une culture d’une nuit de la souche d’essai ° C a été granulée et lavée, et la densité bactérienne a été ajustée à une densité optique de La suspension bactérienne a été incorporé dans des bouchons d’agarose% d’agarose; bouchons -μL Les bouchons ont ensuite été placés dans du tampon de lyse mM Tris, M NaCl, EDTA mM,% d’acide désoxycholate de sodium,% sarkosyl contenant de la lysostaphine μg / mL; Ambi, lysozyme μg / mL; Sigma, et RNAse U / mL et incubés pour h à ° C, suivie d’une incubation d’une nuit avec la protéinase K mg / mL en EDTA mM,% sarkosyl à ° C Après lavage avec Tris mM-EDTA mM pH pH, le Les bouchons ont été digérés avec SmaI U / ml pendant h à ° C, puis chargés dans le gel et séparés par la taille avec le système CHEF-DR III Bio-Rad. Les conditions pour le PFGE étaient les suivantes: mM Tris-mM Borate-mM EDTA tampon, V / cm, ° C, angle °, et –s changement de temps pour hLes résultats du PFGE ont été entrés dans un programme analytique d’archivage Diversity Database Software, version; Bio-Rad Tous les fragments d’ADN ont été identifiés et leur taille déterminée par comparaison avec les standards de taille moléculaire de chaque gel. Les profils de la souche ont ensuite été comparés à l’aide du logiciel analytique. d’une tolérance de ±% pour les variations de taille de bande de différentes souches Les souches présentant des différences de ⩽% ont été considérées comme étroitement apparentées Sur la base de cette analyse, un arbre phylogénétique a été construit pour illustrer le degré de similarité La relation entre les souches de l’étude et les souches d’une étude en cours sur le portage de S aureus a été évaluée en fusionnant les données de ces isolats avec une base de données préexistante de souches provenant d’un programme de maintenance à la méthadone provenant d’une zone géographique adjacente. différents sujets, y compris les anciens et actuels toxicomanes Le profil PFGE de tous les temps Le dixième isoler jusqu’à un total de souches de cette cohorte a été utilisé à des fins de comparaison.Assay de la présence d’héroïne ou de cocaïne dans l’attirail Une section de chaque pièce de l’attirail de drogue a été envoyée pour des tests toxicologiques effectués par Bendiner & amp; Schlesinger, New York pour vérifier que l’appareil était utilisé pour sniffer de la cocaïne, de l’héroïne, ou les deux. Les drogues et les drogues ont été élues de l’attirail et concentrées par évaporation. Ceci a été suivi par la chromatographie en phase gazeuse et la surveillance des ions sélectionnés. mL pour l’héroïne et ng / mL pour la cocaïne

Analyse de réseau

Un «réseau biologiquement lié» a été défini comme étant des isolats de cultures nasales ou d’attirail avec un profil PFGE différent de ⩽% comparé à celui du DC pour des comparaisons par paires. Les données de réseaux sociaux proviennent de sources: questionnaire, stratégie de recrutement et observation ethnographique des réseaux sociaux par le responsable de la sensibilisation du programme de sensibilisation communautaire, qui a également mené les interviews Un «réseau social» se réfère à un groupe de personnes liées par des relations sociales Dans notre étude, les «réseaux de risques sociaux» ont été définis comme utilisateurs qui ont déclaré avoir partagé des médicaments avec un autre participant ou qui étaient connus par le responsable de la sensibilisation Sur la base des connaissances historiques et actuelles et des observations de cette population, le responsable de la sensibilisation a pu fournir des informations spécifiques concernant le partage des médicaments partenaires Ces données ont été collectées indépendamment, à l’insu des patients évalués. Les données ont été analysées à l’aide du logiciel SAS, version SAS Institute

Résultats

Cinquante-quatre toxicomanes par inhalation ont participé à cette étude Treize personnes ont fourni des échantillons nasaux ou des accessoires pour la culture à des occasions. Les sujets ont parfois fourni des échantillons, et les sujets ont fourni des échantillons à diverses occasions. comme leur information médicale, sont résumées dans le tableau Les sujets étaient principalement de l’ethnie hispanique Les utilisateurs de drogues ont inhalé l’héroïne% de sujets, cocaïne%, ou les deux% La plupart des sujets% ont déclaré utiliser des médicaments par inhalation pour & gt; Soixante pour cent ont déclaré qu’ils partageaient la drogue avec d’autres personnes Cinquante-six pour cent ont déclaré qu’ils s’injectaient aussi de la drogue

Tableau View largeTélécharger slideCaractéristiques des toxicomanes évalués pour le transport de Staphylococcus aureusTable View largeTélécharger slideCaractéristiques des utilisateurs de drogues évaluées pour le transport de Staphylococcus aureusDétections microbiologiques pour prélèvements nasaux et attirail de drogue Il y avait des prélèvements nasaux et des morceaux d’attirail de paille et d’allumettes cultivés par les usagers de drogues. les cultures nasales ou de l’attirail des utilisateurs étaient positives pour S aureus Ces utilisateurs de drogues ont contribué aux cultures positives des cultures nasales et des cultures de l’attirail de drogues par inhalation; ce dernier se composait de pailles et d’un cahier d’allumettes Vingt-huit échantillons d’attirail testés pour l’héroïne ou la cocaïne étaient positifs Trois des pailles positives au test étaient positives pour la culture; Les cultures de l’échantillon nasal et de l’attirail étaient positives. Il est à noter que l’attirail de ce sujet a été colonisé avec des souches de S aureus étroitement apparentées. Les deux souches de l’attirail ont été analysées par PFGE, résultant en un total d’échantillons Obtenus à partir de différents individus Tous les isolats de S aureus étaient sensibles à l’oxacilline, céphalothine, gentamicine, rifampine, triméthoprime-sulfaméthoxazole et vancomycine Ils étaient uniformément résistants à la pénicilline Un seul isolat était résistant à la clindamycine, à l’érythromycine et à la lévofloxacine. figure Quatre groupes de souches biologiquement liés ont été identifiés groupe A, isolats, qui contenaient des isolats phénotypiquement distincts du sujet; groupe B, isolats; groupe C, isolats; et le groupe D, isolats Il y avait des ensembles d’isolats identiques dans le groupe A un ensemble avec des isolats et l’autre avec des isolats, avec un DC de parenté entre les ensembles Les isolats dans le groupe B ont eu des CD différents en comparaison les uns des autres, mais tous être très étroitement liés, avec des valeurs de DC de – Les isolats des groupes C et D étaient étroitement liés les uns aux autres au sein de chaque groupe, avec des DC de et, respectivement

Figure Vue grandDownload slidePFGE de tous les isolats trouvés en Staphylococcus aureus en culture Les groupes de souches apparentées sont regroupés séparément et identifiés par lettre Les souches uniques sont sur la droite Les nombres sur le fond se réfèrent aux sujets P, paraphernaliaFigure View largeTélécharger la lamePFGE de tous les isolats trouvés être Staphylococcus aureus en culture Les groupes de souches apparentées sont groupés séparément et identifiés par lettre Les souches uniques sont sur la droite Les nombres sur le fond se réfèrent aux sujets P, attirailPour démontrer l’étendue de la similarité des réseaux biologiques, isolats S aureus récupérés des participants à un programme d’entretien à la méthadone a été combiné avec les isolats de cette étude pour voir si les premiers isolats étaient distribués aléatoirement dans la base de données. Le dendrogramme résultant montre que les liens biologiques ont été préservés sans intervention des autres souches et, en fait, la majorité des les souches de cette étude sont restées étroitement imbriqué dans l’ensemble de l’échantillon d’isolats

Figure Vue largeDownload slideDendrogramme illustrant la similarité des souches d’isolats de Staphylococcus aureus analysés par Carrés PFGE, cultures nasales; triangles, cultures d’attirail; vert, isolats du groupe A; rouge, isolats du groupe B; bleu, isolats du groupe C; jaune, isolats du groupe D; isolats noirs et uniques; blanc, isolats de la clinique de méthadoneFigure View largeTélécharger la diapositive Dendrogramme illustrant la similarité des souches d’isolats de Staphylococcus aureus analysés par les carrés PFGE, cultures nasales; triangles, cultures d’attirail; vert, isolats du groupe A; rouge, isolats du groupe B; bleu, isolats du groupe C; jaune, isolats du groupe D; isolats noirs et uniques; blanc, isolats de la méthadone analyse du réseau de drogues d’usage Identification des réseaux sociaux, compte tenu des usagers de drogues interviewés La taille des réseaux variait d’une personne à l’autre Dix-huit personnes étaient non liées à d’autres toxicomanes, c.-à-d rage. les sujets ont été approchés et où la consommation de drogue est survenue sont résumés dans la figure La maison de crack utilisée par la plupart des sujets [%] était l’épicentre des réseaux biologiques, avec ⩾ membre de chaque réseau biologique fréquentant le site. positif pour S aureus a rapporté qu’ils partageaient l’attirail avec d’autres Deux des échantillons de l’attirail positif provenaient de sujets qui partageaient l’attirail des utilisateurs de culture négative,% d’entre eux prétendaient partager leurs drogues ou leur attirail en général

Figure Vue largeDownload slideLinkage de participants à une étude positive sur la base d’informations ethnographiques, d’entretiens et d’informations épidémiologiques moléculaires Le placement des sujets était basé sur l’endroit où le sujet était interviewé et où le responsable de la sensibilisation indiquait qu’une personne utilisait des drogues ou vivait Les résultats de la culture ne sont affichés que lorsque les sujets sont socialement liés à des individus ayant une culture positive du nez ou de l’attirailFigure View largeTélécharger slideLinkage de participants à une étude positive sur la base d’informations ethnographiques, d’entretiens et d’épidémiologie moléculaire Les résultats des analyses de réseaux biologiques et sociaux sont résumés dans Les données pour les sujets dont les résultats de culture sont négatifs ne sont affichées que lorsque ces sujets sont socialement liés à des personnes ayant une culture positive du nez ou de l’attirail physique Dix des sujets positifs sont contenus dans les réseaux sociaux. Les profils du PFGE suggéraient des liens supplémentaires qui n’étaient pas autrement identifiables. Par exemple, les sujets et le groupe A étaient d’abord reliés par le PFGE, et la sensibilisation Sur la base de sa connaissance de ce réseau de toxicomanie, la gestionnaire a lié de manière indépendante ces usagers de drogues. Deux autres liens biologiques B et C ont été reliés par l’utilisation de la maison de crack.

Discussion

nks qui n’ont pas pu être identifiés par l’analyse de réseaux sociaux seule De même, Klovdahl et al ont combiné des méthodes de biologie moléculaire, épidémiologie et analyse de réseau pour documenter une épidémie de tuberculose. Notre étude illustre l’importance de cette approche, démontrant la similitude des souches Parmi les utilisateurs de drogue interrogés dans une zone géographique limitée, l’approche intégrée a identifié un épicentre probable de la transmission. Des représentants de tous les réseaux biologiquement liés ont été trouvés dans la maison de crack. Notre étude diffère des autres en ce qu’elle une situation non effractive Elle montre le potentiel des souches de S aureus à devenir résident dans une population, servant de réservoirs potentiels pour de futures infections et une transmission ultérieure. Nous ignorons d’autres études qui ont examiné la contribution potentielle de l’inhalation de drogues à l’infection, sans parler des transmission de S aureus comme base pour les colonisateurs subséquents sation Holbrook et al ont observé un taux accru de la colonisation nasale par S aureus chez les utilisateurs de drogues par inhalation infectés par le VIH, ce qui suggère que l’attirail de drogues par inhalation jouent un rôle potentiel dans la transmission Contrairement aux études antérieures de l’attirail de drogues par injection [,,], des morceaux de attirail d’inhalation ont été culture positive dans la présente étude Ceci est probablement lié à la forte densité de staphylocoques dans les Nares des transporteurs et la capacité de staphylocoques à survivre pendant une période prolongée sur des surfaces environnementales Ces données appuient l’idée que l’attirail sont un moyen potentiel de transmission de souches Les variables importantes qui n’ont pas été évaluées dans la présente étude et qui justifient un examen plus approfondi comprennent la fréquence et la nature de la consommation de drogues, le nettoyage de la peau, la présence ou l’absence de lésions cutanées ouvertes et l’infection par le VIH. ce réseau d’usagers de drogues était sensible à la plupart des antimicrobiens, Les réseaux d’utilisation des tapis sont susceptibles de servir de réservoirs pour les souches de S. aureus résistantes aux antimicrobiens comme le SARM dans la communauté. Exposition des membres du réseau utilisant des médicaments aux personnes atteintes du SIDA, hospitalisation récente ou utilisation d’antibiotiques prescrits ou auto- Parmi une population de pauvres citadins de San Francisco ayant des antécédents de consommation de drogues injectables,% ont été colonisés par S aureus, dont% ont été colonisés par le SARM de la présente étude doit être interprétée avec prudence, car les données détaillées des réseaux sociaux n’ont pas été collectées, et il est possible que davantage de liens biologiques aient pu être soutenus par des données supplémentaires. En outre, les tests toxicologiques effectués sur les échantillons ont été testé n’a pas confirmé que tous les échantillons donnés ont été utilisés. Un échantillon négatif était positif pour S aureus, suggérant peut-être un rôle pour les mains dans le transfert des staphylocoques Les sujets étaient souvent pressés, ne voulaient pas fournir d’informations sur leurs pratiques de réseautage et de comportement, ou se méfiaient de nos intentions. D’autres ont noté ces limites lorsqu’ils travaillaient avec cette population Bien que la capacité de définir L’utilisation des réseaux dans cette étude était limitée en raison des contraintes de collecte de données dans un environnement ouvert, des informations suffisantes étaient disponibles pour démontrer le rôle déterminant d’une fosse de crack spécifique dans l’acquisition et la transmission des souches et la puissance de l’analyse moléculaire. La présente étude démontre que les usagers de drogues restent un réservoir urbain potentiel de S aureus La transmission des souches au sein de ce groupe semble être liée au comportement d’utilisation de drogues, à l’organisation sociale de l’usage de drogues les réseaux, et l’environnement dans lequel se produit l’usage commun de drogues. illustre l’intérêt de combiner des outils épidémiologiques moléculaires avec la méthodologie du réseau social L’utilisation d’une approche à multiples facettes pour identifier les relations sociales a permis de démontrer des liens beaucoup plus étendus que ce qui était suggéré par les données ethnographiques ou anticipées au début de l’enquête. La transmission de souches au sein de ce groupe à haut risque augmente le risque d’infection subséquente [,,], en particulier chez les sujets infectés par le VIH Autres études incorporant des outils épidémiologiques moléculaires pour étudier la transmission, la colonisation et la maladie du S aureus. Cette étude s’ajoute aux recherches de plus en plus nombreuses qui intègrent la biologie moléculaire, l’épidémiologie et les méthodologies de réseaux sociaux dans le but de comprendre la dynamique de transmission des maladies infectieuses. dans les populations utilisatrices de drogues